骨硬組織切片染色的步驟是固定、脫水、染色、透明以及封片。骨硬組織切片是為了觀察骨組織的結構和病理變化的一種技術，在生物學和醫學研究中被廣泛應用。
1.固定：被切下的骨硬組織樣本需要立刻使用乙醇或甲醇等固定劑進行固定，可以使骨硬組織盡可能的保持原本結構，防止骨硬組織分解。
2.脫水：需要將固定好的骨硬組織浸泡在濃度逐漸上升的乙醇溶液中，將骨硬組織內部的水分替換出來。
3.染色：對已經脫水的骨硬組織使用伊紅、蘇木精等染料進行染色，可以使骨硬組織結構和組成更為清晰。
4.透明：染色完成後，需要使用透明劑讓骨硬組織變得透明，消除骨硬組織的紋理和顏色。
5.封片：將處理後的骨硬組織切片放在載玻片上，使用樹膠或明膠等封片劑進行封固，可以避免骨硬組織切片移動或碎裂。
處理骨硬組織切片的過程中，應用的化學試劑可能會產生對機體有害的物質，所以需要嚴格按照操作要求處理，並且還要做好防護工作。若在處理骨硬組織切片的過程中，體內有不適，建議盡快前往醫院進行處理。
