確定是否為硬下疳可從臨床表現、病史、實驗室檢查、鑒別診斷、醫生診斷等方面判斷。
1. 臨床表現：硬下疳通常為單個無痛性炎性丘疹，迅速發展成境界清楚的圓形或橢圓形無痛性潰瘍，直徑約 1 - 2cm，周邊水腫並隆起，基底呈肉紅色，觸之有軟骨樣硬度，表面有漿液性分泌物，內含大量梅毒螺旋體，傳染性極強。好發於外生殖器，男性多見於陰莖冠狀溝、龜頭、包皮及系帶，女性多見於大小陰唇、陰唇系帶、會陰及宮頸，發生於生殖器外者少見。
2. 病史：瞭解是否有高危性行為，如與梅毒患者發生無保護的性接觸等。梅毒的傳播途徑主要是性傳播，有此類高危接觸史對判斷硬下疳有重要提示作用。
3. 實驗室檢查：暗視野顯微鏡檢查，若在皮損處取材能發現梅毒螺旋體可確診；梅毒血清學試驗，非梅毒螺旋體抗原血清試驗如 RPR、TRUST 等可用於篩查和療效觀察，梅毒螺旋體抗原血清試驗如 TPPA、TPHA 等用於確診。
4. 鑒別診斷：需與軟下疳、生殖器皰疹、固定型藥疹等疾病相鑒別。軟下疳為疼痛性潰瘍，邊緣不整齊，質地柔軟；生殖器皰疹多為簇集或散在的小水皰，破潰後形成糜爛或潰瘍，疼痛明顯；固定型藥疹有明確的用藥史，皮損多為圓形或橢圓形紅斑、水皰等。
5. 醫生診斷：專業皮膚科醫生會綜合上述各項信息，結合臨床經驗進行準確判斷。若高度懷疑硬下疳，應及時就醫檢查診斷。日常生活中要注意保持良好的個人衛生習慣，避免高危性行為。一旦確診，需嚴格遵醫囑進行規範治療，定期復查，以確保徹底治癒，防止病情復發或進展。
