從血液中分離血清常見的方法有自然凝固法、離心分離法、促凝劑法、化學沈澱法、層析法等。
1. 自然凝固法:將採集的血液標本置於室溫下,讓血液自然凝固。血液中的纖維蛋白原會逐漸轉變為纖維蛋白,形成血凝塊。隨著時間推移,血凝塊會發生收縮,血清會逐漸析出並積聚在血凝塊周圍。一般需等待1 - 2小時,具體時間因溫度等因素有所差異。這種方法操作簡單,但耗時較長。
2. 離心分離法:把採集好的血液標本放入離心機中,設置合適的轉速和時間進行離心。在離心力的作用下,血液中的紅細胞、白細胞等有形成分下沈到管底,而血清則會分層在上方。通常轉速在3000 - 4000轉/分鐘,離心5 - 10分鐘即可獲得較為純淨的血清。該方法分離速度快,效果好。
3. 促凝劑法:在採集血液的容器中預先添加促凝劑,促凝劑能加速血液凝固過程。血液採集後,促凝劑促使纖維蛋白原快速轉化為纖維蛋白,加速血凝塊形成,進而縮短血清分離時間。一般在添加促凝劑後,血液在數分鐘內即可凝固,隨後通過離心等方式獲取血清。
4. 化學沈澱法:利用某些化學物質與血液中的特定成分發生反應,使其沈澱下來,從而實現血清與其他成分的分離。例如加入特定的鹽溶液或有機試劑,使蛋白質等成分沈澱,經過過濾或離心等操作,得到上層的血清。不過該方法可能會對血清成分產生一定影響。
5. 層析法:通過將血液樣品注入層析柱,利用不同物質在固定相和流動相之間的分配系數差異,使血清中的各種成分在層析柱中得以分離。這種方法能較為精細地分離血清中的不同成分,但操作複雜,對設備和技術要求較高。
在進行血清分離操作時,要嚴格遵守實驗室規範和操作流程。確保採集血液的容器清潔無菌,避免污染。根據實際需求和樣本特點選擇合適的分離方法,操作過程中注意控制溫度、時間、轉速等參數。若對操作有任何疑問或不確定,應向專業人員咨詢,以保證分離出的血清質量可靠,滿足後續檢測或研究的要求 。